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对通用转录因子BTF3的补充DNA的测序和表达
X M Zheng1, D Black, P Chambon
1Laboratoire de Génétique Moléculaire des Eucaryotes du CNRS, Unité 184 de Biologie Moléculaire et de Génie Génétique de L'INSERM, Faculté de Médecine, Strasbourg, France.
Nature
|April 5, 1990
概括
研究人员确定了转录因子BTF3的两种形式,这对基因激活至关重要. BTF3a在转录中是活跃的,而BTF3b,一个更短的版本,尽管结合RNA聚合酶II,但不活跃.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 基因规则 基因规则
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 细胞基因转录的启动需要在促进子元素上组建一个多蛋白质复合体.
- 关键成分包括RNA聚合酶II和一般的转录因子,如BTF1,BTF2,BTF3和STF.
- 通过STF促进的BTF1与TATA盒结合是复杂形成的最初步骤.
研究的目的:
- 克隆和表征转录因子BTF3,该转录因子BTF3此前已被净化,但由于细胞丰度较低,难以研究.
- 调查BTF3.3潜在异型之间的功能差异.
- 了解BTF3在转录启动复合体组装中的作用.
主要方法:
- 纯化的BTF3.3的序列.
- 基于序列的互补DNA (cDNA) 的克隆.
- 克隆蛋白质的表征,包括RNA聚合酶II结合试验和转录活性评估.
主要成果:
- 克隆了两个cDNA:一个编码BTF3a,与纯化的BTF3匹配,另一个编码较短,转录不活的蛋白质BTF3b.
- BTF3b缺乏BTF3a的前44个残留物.
- BTF3a和BTF3b都能与RNA聚合酶II形成稳定的复合体,但只有BTF3a在转录方面具有活性.
结论:
- 这项研究成功地克隆和表征了BTF3的两个异型,为进一步研究转录启动提供了工具.
- BTF3a是转录活跃的形式,而BTF3b代表了一个不活跃的变体.
- BTF3b与RNA聚合酶II结合的能力表明它可能发挥调节作用或是前体/降解产物.