使用部分组装的中间体,研究真菌代多基酸合成酶功能的研究
Zhizeng Gao1, Jingjing Wang, Amy K Norquay
1Department of Chemistry, University of Alberta, Edmonton, Alberta, Canada T6G 2G2.
Journal of the American Chemical Society
|January 30, 2013
概括
聚基酸合成酶 (PKSs) 是天然产品生物合成中的关键酶. 这项研究证实了通过代 PKS Hpm8 和 Hpm3 形成脱醇 (DHZ) 的中间体,使得 DHZ 衍生物的产生成为可能.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 酶学 是一种酶学.
背景情况:
- 代多基合成酶 (PKSs) 是大型酶,负责合成复杂的二次代谢产物.
- 激酶抑制剂hypotemycin的生物合成涉及两个代PKSs,Hpm8和Hpm3,在Hypomyces subiculosus*中的合作.
- 关于PKS装配线的精确编程规则仍然不完全理解.
研究的目的:
- 确认中介物在脱水泽阿伦 (DHZ) 的形成中的身份,这是假定胺生物合成中的关键中介物.
- 阐明代PKS Hpm8和Hpm3.3的酶机制和基质特异性.
- 通过酶工程探索产生新型DHZ衍生物的潜力.
主要方法:
- 使用纯化的代PKS酶Hpm8和Hpm3.
- 采用 (13) C标记的N-乙烯基半胺 (SNAC) 硫乙烯基以追踪生物合成中间体的结合.
- 通过监测DHZ的组装来研究酶动力学和基质接受.
主要成果:
- 证实了DHZ.的六基胺部分中假定中间体的身份.
- 证明Hpm8可以接受中介物质的SNAC二 Ester用于转移和组装到DHZ.
- 表明Hpm8和Hpm3合作从这些中间体构建DHZ.
- 观察到在添加修饰的中间类似物后产生DHZ衍生物.
结论:
- 这项研究提供了通过代PKSHpm8和Hpm3.3对DHZ的顺序组装的直接证据.
- 这些发现澄清了这些复杂的酶系统中的基质转移和编程规则.
- 产生DHZ衍生物的能力为发现新的生物活性化合物开辟了道路.
