相关实验视频
通过3'未翻译序列逆转肌酸激酶翻译抑制
J L Ch'ng1, D L Shoemaker, P Schimmel
1Department of Medicine, Duke University, Durham, NC 27710.
Science (New York, N.Y.)
|May 25, 1990
概括
肌酸激酶B (CK-B) 翻译被一种可溶性因子抑制,该因子与其3'非翻译区域 (3'UTR) 结合. 这种结合阻止了CK-B活动,尽管存在CK-B信使RNA.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- U937D细胞表现出与核糖体结合的肌酸酶B (CK-B) 使者RNA (mRNA),但缺乏可检测的CK活性.
- 这表明一种抑制CK-B蛋白质合成的转录后调节机制.
研究的目的:
- 研究抑制CK-B转化在U937D细胞中的机制.
- 确定 CK-B 3' 未翻译区域 (3' UTR) 在翻译调节中的作用.
主要方法:
- 具有CK-B 3' UTR的逆转录病毒载体的U937D细胞的转化.
- 对CK活性和CK-BmRNA丰度的分析.
- 在体外结合试验中,使用S100提取物和CK-B 3' UTR进行了结合试验.
主要成果:
- 使用CK-B 3' UTR的转化恢复了CK活性,但没有改变CK-BmRNA水平.
- CK-B 3' UTR形成了一个复合体,其中的一个成分是来自野生类型细胞的S100提取物.
- 在转化后表达CK活性的细胞的提取物中没有这种结合活性.
结论:
- 一种可溶性因子 (s) 与CK-B 3' UTR结合,抑制CK-B转化.
- 这种调节机制控制了CK-B蛋白在翻译层面的表达.