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克隆人类TATA结合蛋白的功能领域和上游激活特性
M G Peterson1, N Tanese, B F Pugh
1Howard Hughes Medical Institute, Department of Molecular and Cell Biology, University of California, Berkeley 94720.
Science (New York, N.Y.)
|June 29, 1990
概括
人类的TATA结合蛋白 (TFIID) 被克隆和特征. 它保存的C端区域对于TATA盒结合和基底转录至关重要,而N端区域则调解与特定调节者的相互作用.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 基因规则 基因规则
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 塔塔结合蛋白 (TFIID) 对于启动真核mRNA合成至关重要.
- 了解TFIID的结构和功能是解读基因转录调节的关键.
研究的目的:
- 克隆和描述人类的TATA结合蛋白 (TFIID).
- 研究TFIID不同区域在转录启动中的功能作用.
主要方法:
- 在大肠杆菌和HeLa细胞中克隆和表达人类TFIIDcDNA.
- 人类TFIID与Drosophila和酵母的同类蛋白质的序列比较.
- 对TFIID的DNA结合和转录促进活动的分析.
- 研究TFIID与其他转录因子 (TFIIA,TFIIB,Sp1) 的相互作用.
主要成果:
- 人类TFIID序列显示了一个高度保守的C终端区域 (180个氨基酸) 和一个分离的N终端区域.
- 人类TFIID的N端区域含有38种谷胺残留物的显著延伸.
- 保存的TFIID的C端部分足以用于TATA盒结合和基底转录.
- 全长TFIID,但不是一个缺少N端的截断版本,支持Sp1-激活的转录.
结论:
- TFIID的C端域对于核心转录功能至关重要.
- TFIID的分离的N终端区域在调解与特定转录激活剂 (例如,Sp1) 的相互作用方面发挥着关键作用.
- 为了使TFIID与特定的基因调节器相互作用,可能需要额外的辅助激活蛋白.