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Updated: May 7, 2026

12:04
Mouse Genome Engineering Using Designer Nucleases
Published on: April 2, 2014
通过CRISPR/Cas介导基因组工程携带记者和条件等位基因的小鼠的一步生成
Hui Yang1, Haoyi Wang, Chikdu S Shivalila
1Whitehead Institute for Biomedical Research, Cambridge, MA 02142, USA.
Cell
|September 3, 2013
概括
这项研究展示了CRISPR-Cas9系统.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- II型细菌的CRISPR/Cas系统提供了一种新的基因组工程技术.
- 多复合基因向是这个系统的一个关键特征.
研究的目的:
- 使用CRISPR-Cas9系统创建记者和条件突变小鼠.
- 评估CRISPR-Cas9在产生转基因小鼠中的效率和特异性.
主要方法:
- 与Cas9mRNA,指导RNA (sgRNA) 和DNA载体一起注射紫光体.
- 利用针对特定基因 (Nanog, Sox2, Oct4, Mecp2) 的sgRNA进行记者插入或基因删除.
- 对基因改造小鼠和ESC线的潜在脱突变的分析.
主要成果:
- 成功生成了具有 Nanog,Sox2 和 Oct4 基因的记者构造的小鼠.
- 创造了Mecp2条件突变小鼠和小鼠,在Mecp2基因中大约有700bp的缺失.
- 只有在罕见的情况下确定了非标突变,表明高特异性.
结论:
- 克里斯普尔-Cas9系统提供了一个高效的单步程序,用于生成转基因小鼠.
- 这项技术有助于创建用于研究的报告者和条件突变模型.
- 该系统表现出高特异性,观察到最小的目标外突变.

