在Saccharomyces cerevisiae中的蛋白-氨酸激酶活性

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 氨酸酸化在更高的真核生物中对细胞生长控制起着至关重要的作用.
• 细菌酵母为研究细胞过程提供了独特的分子和遗传工具.
• 研究酵母中的氨酸激酶活性可以提供在更复杂的生物体中不容易获得的见解.

研究的目的:

• 为了确定Saccharomyces cerevisiae中氨酸激酶活性的存在和特征.
• 评估酵母作为研究细胞生长调节中氨酸酸化的模型系统的潜力.

主要方法:

• 酵母提取物是从Saccharomyces cerevisiae中制备的.
• 在体外激酶试验中,使用谷氨酸和氨酸 (80:20) 的随机共聚合物作为基质进行了试验.
• 用[-32P]腺三酸盐 (ATP) 作为酸盐供体测量酸化.
• 内源酵母蛋白也被分析为酸铁含量.
• 进行了对照实验,以排除核酸互转化作为酸铁素的来源.

主要成果:

• 酵母提取物证明了在添加的共聚合物上酸化氨酸残留物的能力.
• 酸化反应在时间和蛋白质度方面是线性的.
• 在内源性酵母蛋白中,氨酸占氨基酸总量的0.1%.
• 在酵母提取物中观察到的特定激酶活性明显低于胚胎纤维细胞提取物中发现的特定激酶活性 (约为1%).
• 实验证实,核酸相互转化,腺化和水解并没有解释观察到的型氨酸生成.

结论:

• 细菌菌具有氨酸激酶活性,尽管与较高的真核生物相比,其水平较低.
• 酵母可以在外源基质和内源蛋白质中酸化氨酸残留物.
• 这项研究验证了酵母作为研究细胞生长控制中氨酸酸化的基本机制的潜在模型.
• 需要进一步的研究,以确定涉及的特定铁氨酸激酶及其在酵母中的作用.