使用细胞透,基于机制的光小分子探针揭示CD38细胞定位.
Jonathan H Shrimp1, Jing Hu, Min Dong
1Department of Chemistry and Chemical Biology, Cornell University , Ithaca, New York 14853, United States.
Journal of the American Chemical Society
|March 26, 2014
概括
一个新的光探针揭示了尼古丁胺胺腺因二核酸 (NAD) 代谢酶CD38主要位于细胞表面,而不是细胞内部. 这一发现影响了对CD38的理解.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 酶学 是一种酶学.
背景情况:
- 尼古丁胺胺氨基二核酸 (NAD) 是一个关键的信号分子,参与了许多生物通路.
- CD38是一种哺乳动物酶,可以代谢NAD,将其转化为腺二酸盐 рибо (ADPR) 和循环腺二酸盐 рибо (cADPR).
- 无论是在血上还是细胞内,CD38的细胞定位对于理解其生理功能和对NAD水平的潜在影响至关重要.
研究的目的:
- 开发和应用一种新型的细胞透,光小分子探针 (SR101-F-araNMN),用于活细胞中基于活动的CD38标记.
- 为了准确验证CD38的细胞内定位,解决冲突的先前报告.
- 阐明CD38的主要细胞局部化及其对NAD代谢的影响.
主要方法:
- 合成一种细胞透的光小分子探针SR101-F-araNMN,用于对酶活性CD38进行共价标记.
- 光探针的应用在Raji,RA治疗的HL-60和K562细胞系中进行活细胞成像.
- 使用基于活动的光探针对CD38定位的验证,对活细胞的干扰最小.
主要成果:
- 光探针SR101-F-araNMN在活细胞中成功标记了酶活性CD38.
- CD38主要定位在拉吉和RA治疗的HL-60细胞的血膜上.
- 在K562细胞中没有检测到CD38的表达,这与之前关于仅细胞内CD38.8的报道相矛盾.
结论:
- 开发的基于光活动的探针提供了一种可靠的方法来确定不同细胞类型的CD38局部.
- 这些发现表明CD38主要是用于化细胞外NAD,而不是细胞内NAD.
- 这项研究增强了对CD38在NAD代谢和细胞信号传递中的生理作用的理解.
