使用自我引用的外部腔激光生物传感器检测蛋白质与小分子的结合
Meng Zhang1, Jessie Peh, Paul J Hergenrother
1Department of Physics, ‡Department of Chemistry, §Department of Bioengineering, and ⊥Department of Electrical and Computer Engineering, University of Illinois at Urbana-Champaign , Urbana, Illinois 61801, United States.
Journal of the American Chemical Society
|April 12, 2014
概括
我们开发了一种新的激光生物传感器,用于对小分子药物相互作用与蛋白质标进行无标签查. 这种高通量方法能够准确地检测出结合 afinities,从而实现高效的药物发现.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 生物物理学的生物物理.
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 高通量查 (HTS) 通常使用色度测定或度测定用于酶标.
- 对于非酶蛋白点的现有方法往往缺乏简单性或吞吐量.
- 对于蛋白质-小分子相互作用,需要无标签,高通量技术.
研究的目的:
- 开发一种新的,高分辨率,高灵敏度的生物传感器,用于无标签检测小分子-蛋白相互作用.
- 克服现有的HTS方法对非酶性标的局限性.
- 为了证明生物传感器在药物发现查中的实用性.
主要方法:
- 使用了一种自我引用的外部腔激光 (ECL) 生物传感器.
- 实现了亚皮科米特波长准确度,以消除热噪声.
- 固定了各种蛋白质点,用于相互作用研究.
主要成果:
- 检测到小型分子与固定蛋白质结合,其亲和度从亚纳米到低微分子.
- 在碳酸酶II抑制剂查中,成功地将已知抑制剂与非活性化合物区分开来.
- 在无标签检测中实现了高分辨率和灵敏度.
结论:
- 自引用ECL生物传感器提供了一个强大的,无标签的HTS平台,用于识别蛋白质标的小分子调节器.
- 这项技术解决了当前对非酶性标的选方法的局限性.
- 生物传感器对于"禾堆中的针"药物发现屏幕是有效的.
