代谢化学记者结构的变化产生了对O-GlcNAc修饰的选择性探测
Kelly N Chuh1, Balyn W Zaro, Friedrich Piller
1Department of Chemistry and §Department of Molecular and Computational Biology, University of Southern California , Los Angeles, California 90089-0744, United States.
Journal of the American Chemical Society
|August 26, 2014
概括
6-azido-6-deoxy-N-acetyl-glucosamine (6AzGlcNAc) 是O-GlcNAcylated蛋白质的一个特定的代谢化学记者 (MCR). 与其他MCR不同,6AzGlcNAc只标记细胞内蛋白质,从而能够精确分析O-GlcNAcylation.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 葡萄糖生物学 葡萄糖生物学
- 化学生物学 化学生物学
背景情况:
- 代谢化学报告器 (MCRs) 是可视化活细胞中糖蛋白的关键工具.
- 以前的MCRs经常进入多个糖基化通路,限制了它们的特异性.
- 开发针对不同类型的葡萄糖化选择性MCR是一个重大挑战.
研究的目的:
- 确定和验证O-GlcNAcylated蛋白质的特定MCR.
- 与其他MCR相比,研究6AzGlcNAc的代谢命运和标记特异性.
- 阐明6AzGlcNAc实现选择性纳入的机制.
主要方法:
- 使用6AzGlcNAc,N-azidoacetyl-glucosamine (GlcNAz) 和N-azidoacetyl-galactosamine (GalNAz) 的比较蛋白质组学.
- 生物化学分析MCR的代谢转化和细胞结合.
- 在体外的酶分析来研究MCR酸化途径.
主要成果:
- 6AzGlcNAc专门标记细胞内O-GlcNAcylated蛋白质.
- GlcNAz和GalNAz标记了细胞内和细胞外/光内糖蛋白.
- 6AzGlcNAc通过AGM1.1的直接酸化绕过了正规的救援途径.
结论:
- 6AzGlcNAc是O-GlcNAcylated蛋白质的选择性MCR,可以进行特定的细胞内分析.
- 这些发现表明,有可能为其他类型的糖基化开发选择性MCR.
- 细胞代谢灵活性影响自然和非自然碳水化合物的生物合成.
