在sarcoplasmic网膜Ca2+-ATPase预测的跨膜域内的高亲和度Ca2+结合位点的位置

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 膜运输 运输 膜运输

背景情况:

• 阴离子,如Ca2+-ATPase,通过酶中间体运输离子.
• 尽管已知结构,但高亲和度阴离子结合点仍然难以捉摸.

研究的目的:

• 为了确定特定的氨基酸,负责Ca2 + 结合在sarcoplasmic网膜Ca2 +-ATPase.
• 阐明高亲和度离子结合的结构基础.

主要方法:

• 采用了聚核酸导向的,特定于位点的突变发生.
• 突变的Ca2+-ATPase酶是通过改变特定的氨基酸残留物而产生的.

主要成果:

• 改变Glu 309,Glu 771,Asn 796,Thr 799,Asp 800或Glu 908导致Ca2+运输和Ca2+依赖酸化的完全丧失.
• 突变酶显示化与无机酸盐,即使存在Ca2 +,与野生类型不同.

结论:

• 至少有六个极性,含氧的残留物对Ca2+结合至关重要.
• 这些残留物位于超膜域的中心附近,可能形成高亲和度Ca2+结合点.