用CRISPR-Cas9敲击小鼠进行基因组编辑和癌症建模
Randall J Platt1, Sidi Chen2, Yang Zhou3
1Broad Institute of MIT and Harvard, Cambridge, MA 02142, USA; McGovern Institute for Brain Research, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, MA 02139, USA; Department of Brain and Cognitive Sciences, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, MA 02139, USA; Department of Biological Engineering, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge, MA 02139, USA.
我们开发了一个Cre-依赖的Cas9敲击鼠标,用于体内基因组编辑. 这种工具可以通过同时改变关键基因来模拟复杂的疾病,如肺腺癌.
科学领域:
- 遗传学 是一个遗传学.
- 分子生物学分子生物学
- 癌症研究 癌症研究
背景情况:
- 克里斯普尔-Cas9是一种强大的基因研究工具.
- 在体内,CRISPR-Cas9的应用正在扩大.
- 需要高效的基因组编辑系统来进行疾病建模.
研究的目的:
- 为了创建一个多功能,Cre-依赖的Cas9敲击鼠标模型.
- 为了证明体内和体外的基因组编辑能力.
- 通过准关键突变基因来建模肺腺癌.
主要方法:
- 一个Cre-依赖的Cas9敲击鼠标的生成.
- 通过AAV,lentivirus或粒子方法传递导向RNA.
- 在体内同时对KRAS,p53和LKB1基因突变进行建模.
主要成果:
- 在各种细胞类型 (神经元,免疫,内皮细胞) 中成功进行体内和体外基因组编辑.
- 使用AAV传递诱导p53和Lkb1中的功能丧失突变.
- 通过同质导向修复生成Kras(G12D) 突变,导致肺腺癌.
- 对多个基因突变的同时建模的演示.
结论:
- 开发的Cas9小鼠可用于广泛的体内基因组编辑应用.
- 这项技术使复杂遗传疾病的快速准确建模成为可能.
- Cas9小鼠是生物研究和疾病建模的宝贵工具.
更多相关视频
07:52In Vivo CRISPR/Cas9 Screening to Simultaneously Evaluate Gene Function in Mouse Skin and Oral Cavity
Published on: November 2, 2020
10:21Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells
Published on: January 5, 2018
相关概念视频
CRISPR/Cas9 Genome Editing
CRISPR
In-vitro Mutagenesis
CRISPR and crRNAs
The CRISPR-Cas system stores a copy of foreign DNA in the host genome and uses it to identify the foreign DNA upon reinfection. CRISPR-Cas has three different...
