一个携带亲和分子的三臂支架,用于通过原子力显微镜进行多重识别成像:合成,附加到尖端,并检测蛋白质
Saikat Manna1, Subhadip Senapati1, Stuart Lindsay1
1†Biodesign Institute, ‡Department of Chemistry and Biochemistry, and §Department of Physics, Arizona State University, Tempe, Arizona 85287, United States.
Journal of the American Chemical Society
|May 22, 2015
概括
我们开发了多重识别成像 (mRI),一种用于同时检测蛋白质的新型原子力显微镜 (AFM) 方法. 这种技术可以在单个样本中识别多个低丰度蛋白质生物标记物的敏感,无标签的识别.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 纳米技术 纳米技术
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 原子力显微镜 (AFM) 能够使用功能化的尖端检测单分子蛋白质.
- 同时检测多个配色生物分子对于生物化学分析至关重要.
- 目前的AFM方法仅限于一次检测单个分析物.
研究的目的:
- 开发使用AFM同时检测蛋白质的多重成像方法.
- 为了使多个分析物同时在单个AFM尖端上进行识别.
- 创建一个无标签的系统来检测低丰度蛋白质生物标志物.
主要方法:
- 通过将两个不同的亲和性分子 (核酸体或体-) 与三臂链接器结合,开发了一个识别头.
- 通过无催化剂点击反应,将识别头连接到AFM尖端.
- 利用AFM扫描和图像蛋白质样本,分析亲和单位与它们的亲属的结合.
主要成果:
- 证明识别头内的每个亲和单位可以独立而准确地识别其特定目标.
- 仅使用2-3μL的样本,在低至~2 ng/mL的度下,实现了敏感蛋白质检测.
- 表明混合样本中的蛋白质比可以通过计算单个分析物信号来确定.
结论:
- 多重识别成像 (mRI) 是一种基于AFM的敏感和特定的方法,用于同时检测蛋白质.
- 该mRI方法允许对多种蛋白质生物标记物的无标签量化.
- 这种技术在生物化学研究和诊断中对低丰度蛋白质的分析具有重大潜力.
