双ReAsH的旋转限制的化性
Allison S Walker, Paul R Rablen1, Alanna Schepartz
1Department of Chemistry & Biochemistry, Swarthmore College , 500 College Avenue, Swarthmore, Pennsylvania 19081, United States.
Journal of the American Chemical Society
|May 11, 2016
概括
在活细胞蛋白研究中使用的ReAsH等二染料的光受旋体限制. 这一发现解释了染料的行为,并指导了改进的蛋白质标记工具的设计.
科学领域:
- 生物化学
- 分子生物学
- 化学生物学
背景情况:
- 化二染料 (例如,FlAsH,ReAsH) 能够在活细胞中可视化具有四半素 (Cys4) 图案的蛋白质.
- 在Cys4结合时染料光的机制尚不清楚,限制了工具的优化.
研究的目的:
- 阐明ReAsH (4',5'-bis(2-carboxyethyl) - 2',7'-difluoro-4,7-dichlorofluorescein的化机制.
- 确定调节染料-蛋白相互作用和光的结构因素.
主要方法:
- 对ReAsH-Cys4相互作用的计算建模.
- 实验生物物理研究,包括光寿命和强度测量.
- 合成和特征特定的-基旋转物.
主要成果:
- 支持一个旋转器受限的模型,其中光取决于和酸盐的方向.
- 排除了环应变缓解模型的性.
- 与光和实验数据相关的特定As-aryl旋转体.
- 与ReAsH-EDT2相比,ReAsH-Cys4复合物的兴奋状态光寿命更长.
- 在溶剂粘度下显示了ReAsH-EDT2光强度的增加.
结论:
- ReAsH的性主要取决于染料的形态 (旋转).
- 这种理解为设计更有选择性的二染料提供了基础.
- 能够优化蛋白质点,以提高细胞过程的成像和特征.
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