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通过人类自身抗体对血管活性肠道的催化水解
1Department of Pharmacology, University of Nebraska Medical Center, Omaha 68105.
Science (New York, N.Y.)
|June 9, 1989
概括
人体免疫球蛋白G (IgG) 具有催化活性,在 Gln16-Met17 键处化血管活性肠 (VIP). 这种抗体介导的水解遵循迈凯利斯-门顿动力学,表明特定的基质结合和中等的催化效率.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 酶学 是一种酶学.
背景情况:
- 血管活性肠 (VIP) 是一种关键的神经,参与各种生理过程.
- 免疫球蛋白G (IgG) 主要以其在免疫反应中的作用而闻名,而不是典型的酶活性.
研究的目的:
- 研究纯化人体免疫球蛋白G (IgG) 对血管活性肠 (VIP) 的潜在水解活性.
- 描述这种水溶性活动的性质,并确定VIP上的特定裂变部位.
主要方法:
- 使用放射性VIP ([Tyr10-125I]VIP) 作为基板.
- 用三酸沉和逆相高性能液态染色学 (HPLC) 评估了水解.
- 通过抗体沉,蛋白G结合,凝过,Fab片段分析,质谱和序列测定来确认活性.
主要成果:
- 纯化的人体IgG显示出VIP水解活性,通过各种生化和生物物理方法证实了这一点.
- 催化活性局限于IgG的Fab片段.
- 酸序列测序和质谱学确定了VIP中的分裂键为Gln16-Met17.
- 动力分析显示了迈凯利斯-门顿行为,Km为37.9 x 10(-9) M,kcat为15.6 min-1,表明紧密结合和中等的催化效率.
结论:
- 人体IgG具有内在的催化活性,能够化VIP.
- 这种抗体介导的水解发生在Gln16-Met17键上.
- 这些发现表明,抗体可以充当催化剂,扩大它们已知的生物作用.