一种光极化试验,用于结合两种强抑制剂的巨细胞迁移抑制因子和晶体结构
José A Cisneros1, Michael J Robertson1, Margarita Valhondo1
1Department of Chemistry, Yale University , New Haven, Connecticut 06520-8107, United States.
Journal of the American Chemical Society
|June 15, 2016
概括
研究人员开发了一种新的光试验,以识别人类巨细胞迁移抑制因子 (MIF) 抑制剂. 这种方法准确地测量了直接的抑制剂结合,使得对炎症疾病和癌症的有效药物发现成为可能.
科学领域:
- 生物化学
- 医学化学
- 结构生物学
背景情况:
- 人类巨细胞迁移抑制因子 (MIF) 具有基托- 酸盐和细胞因子活动.
- MIF与炎症疾病和癌症有关.
- 现有的使用l-多巴甲基或4-基酸的MIF抑制剂测定有基底不稳定性和光谱干扰.
研究的目的:
- 开发一种强大而准确的检测方法来识别MIF抑制剂.
- 描述新型MIF抑制剂的结合.
- 阐明强烈的MIF抑制剂相互作用的结构基础.
主要方法:
- 用光标记的MIF抑制剂的合成.
- 开发一种基于光偏振的测定方法,用于直接结合测量.
- 用X射线结晶学来确定蛋白质 - 连接体复杂结构.
主要成果:
- 一种新型的光偏振测定准确地测量了直接与MIF结合的抑制剂.
- 该试验成功识别了竞争性,非竞争性和共价性抑制剂.
- 最强效的抑制剂的Kd值约为50nM.
- X射线结构揭示了关键的结合,-和-π相互作用驱动高亲和度结合.
结论:
- 开发的光极化试验适用于MIF抑制剂的高通量选.
- 结构上的洞察力指导了新的强效MIF抑制剂的设计.
- 这项工作为开发针对MIF的新疗法提供了基础.


