帮助克服化学蛋白质合成中的可溶性挑战
Michael T Jacobsen1, Mark E Petersen1, Xiang Ye2
1Department of Biochemistry, University of Utah School of Medicine , 15 North Medical Drive East, Room 4100, Salt Lake City, Utah 84112-5650, United States.
Journal of the American Chemical Society
|August 18, 2016
概括
一种新的链接剂Fmoc-Ddae-OH有助于溶解难以合成蛋白质的. 这种"辅助手"方法简化了使用原生化学结合的大型复杂蛋白质的制备.
科学领域:
- 化学生物学
- 合成化学
- 蛋白质化学
背景情况:
- 原生化学结合 (NCL) 可使合成,但与不溶性相斗争.
- 容易聚合的和中间体阻碍了常规的大型蛋白质的制备.
- 目前的方法缺乏有效的策略来处理困难的序列.
研究的目的:
- 引入一种新型的异构功能链接剂Fmoc-Ddae-OH,以改善合成蛋白质的生产.
- 开发一种通用工具,以克服合成中的溶解性和净化挑战.
- 促进大型和复杂蛋白质的化学合成,包括容易聚合的标.
主要方法:
- 在树脂上加入Fmoc-Ddae-OH链接剂到Lys残留物上.
- Fmoc-SPPS延长以附加一个溶解"帮助手"序列.
- 在NCL组装后,使用温和的水性水分离Ddae连接器.
主要成果:
- 在模型系统中成功应用 (埃博拉病毒C20,核糖体蛋白L31).
- 实现了具有挑战性的97-残留的GroES共素的合成,克服了C端不溶性.
- 验证了合成l-GroES的纯度,结构和伴奏活性,并启用了d-GroES合成.
结论:
- Fmoc-Ddae-OH是一种强大的多功能工具,用于合成具有挑战性的和蛋白质.
- "助手"策略显著提高了基于NCL的蛋白质合成效率.
- 这种方法在复杂和蛋白质合成中广泛适用于克服可溶性问题.
