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酵母HAP2和HAP3:在异构复合体中的转录激活剂
1Department of Biology, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge 02139.
Science (New York, N.Y.)
|April 15, 1988
概括
酵母HAP2和HAP3蛋白在与DNA结合之前形成一个复合体. 这种复合物通过UAS2激活部位调节iso-1-cytochrome c基因的转录.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 酵母遗传学 酵母遗传学
- 蛋白质-DNA相互作用
背景情况:
- 基因转录调节对于细胞功能至关重要.
- 酵母CYC1基因 (iso-1-cytochrome c) 是呼吸链的一个关键组成部分.
- 它的转录由上游激活站点 (UAS) 控制,如UAS2.
研究的目的:
- 为了确定HAP2和HAP3激活剂是否合作结合DNA或形成预组合复合体.
- 为了阐明UAS2介导的转录激活的机制.
主要方法:
- 从HAP2转变为LexA的基因融合,以及从HAP3转变为β-银酸酶的基因融合.
- 使用多个染色学步骤净化标记蛋白质.
- 评估纯化蛋白质复合物的UAS2结合活性.
主要成果:
- 在LexA-HAP2和HAP3-β-galactosidase的成功净化过程中.
- 净化的蛋白质保留了UAS2结合活性.
- 同净化证明,在没有DNA的情况下,HAP2和HAP3会结合在一起.
结论:
- 在DNA结合之前,HAP2和HAP3形成了一个稳定的多子单元复合体.
- 这种预先形成的复合物对于调节酵母CYC1基因转录在UAS2.2的调节至关重要.