相关实验视频
通过相同的基因位点编码两个脂激活蛋白 (SAP-1和SAP-2)
J S O'Brien1, K A Kretz, N Dewji
1Department of Neurosciences, University of California, San Diego, La Jolla 92093.
概括
研究人员确定了对脂激活蛋白-2 (SAP-2) 的补充DNA (cDNA). SAP-2和SAP-1都来自一个共同的前体蛋白,这表明它们具有共同的遗传起源和处理途径.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 脂是关键的细胞组成部分,参与各种生物过程.
- 脊柱脂激活蛋白 (SAP) 促进脊柱脂的酶性水解.
- 之前的研究确定了SAP-1,但SAP-2的完整结构和起源仍然不太清楚.
研究的目的:
- 隔离和描述编码脂激活蛋白-2 (SAP-2) 的互补DNA (cDNA).
- 在基因和蛋白质层面阐明SAP-1和SAP-2之间的关系.
- 研究SAP相关蛋白质的前体蛋白质结构和组织分布.
主要方法:
- 从人类肝瘤库中分离cDNA,使用针对SAP-2的多克隆抗体.
- 单独的cDNAs的核酸序列测序.
- 氨基酸序列和蛋白质域的分析.
- 蛋白质免疫阻塞检测人类组织中的前体和中等大小的SAP类蛋白质.
主要成果:
- 为SAP-2分离了几种cDNA,其中最大的序列与SAP-2氨基酸序列对齐,以及之前识别的SAP-1前体cDNA.
- 成熟的SAP-2的编码序列位于前体cDNA中的SAP-1编码序列的下游.
- SAP-1和SAP-2都来自一个常见的70千多达尔顿前体蛋白,由人类染色体10上的基因编码.
- 前体蛋白质含有四个同源域,每一个大约80个氨基酸长,具有保存的氨酸,糖化和氨酸残留物,以及预测的两螺旋结构.
- 免疫洗证实了大多数人体组织中存在70kDa的SAP前体蛋白和中等大小的SAP样蛋白 (65,50,和31kDa).
结论:
- SAP-1和SAP-2起源于单一的前体蛋白质,这表明它们具有共同的遗传位点和蛋白质分解加工途径.
- 前体蛋白内的四个同源域表明了多个功能单元或进化重复的潜力.
- 前体和中间蛋白质的广泛组织分布意味着SAP相关蛋白质在人体中发挥着重要的生理作用.