增殖细胞核抗原和DNA聚合酶-delta辅助蛋白的功能同一性

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 病毒学 病毒学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 类似病毒40 (SV40) 复制作为细胞DNA复制的模型.
• SV40复制只需要病毒大T抗原,严重依赖宿主细胞酶.
• SV40感染诱导了参与DNA复制和S阶段的细胞酶.

研究的目的:

• 为了在体外识别SV40DNA复制所必需的细胞蛋白.
• 为了研究增殖细胞核抗原 (PCNA) 在SV40复制中的作用.
• 为了描述PCNA和小牛胸腺DNA聚合酶-delta之间的关系.

主要方法:

• 使用了人体细胞的无细胞提取物,并补充了SV40大T抗原.
• 复制的等离子体含有SV40来源的DNA复制在体外.
• 净化并确定了复制延长所需的36K细胞蛋白.
• 将PCNA的特性和功能与调节DNA聚合酶-delta的蛋白质进行了比较.

主要成果:

• 确定增殖细胞核抗原 (PCNA) 作为SV40 DNA复制延长的关键细胞因子.
• 证明PCNA具有相同的物理特征,并被类似于DNA聚合酶-delta辅助蛋白的自身抗体识别.
• 表明PCNA和聚合酶-delta辅助蛋白在刺激SV40复制和增强DNA聚合酶-delta过程性方面具有功能等价.

结论:

• PCNA是SV40 DNA复制的延长阶段的关键细胞蛋白.
• PCNA作为小牛胸腺DNA聚合酶-delta的辅助蛋白质起作用.
• 这些发现表明,DNA聚合酶-delta在动物细胞中延长了复制性DNA合成.