无转染多色纳米技术的细胞透型大型转移染料
Alexey N Butkevich1, Gražvydas Lukinavičius1, Elisa D'Este1
1Department of NanoBiophotonics, Max Planck Institute for Biophysical Chemistry , Am Fassberg 11, 37077 Göttingen, Germany.
Journal of the American Chemical Society
|August 29, 2017
概括
研究人员开发出新的发射红色的光染料, 这些探测器可以使用刺激排放耗尽 (STED) 纳米镜对活细胞中的细胞结构进行高分辨率的多色成像.
科学领域:
- 化学生物学和显微镜学
背景情况:
- 刺激排放耗尽 (STED) 纳米镜需要专门的光探头来进行高分辨率的活细胞成像.
- 现有的探测器通常具有小的斯托克斯移位,限制多色成像能力,并可能导致光谱重叠.
研究的目的:
- 设计和合成具有较大的斯托克斯移位 (>140 nm) 的新型细胞透发射光染料.
- 开发针对特定细胞器官和结构的探针,包括线粒体,溶解体和F-actin.
- 证明这些探针在各种细胞类型中的多色STED纳米镜中的实用性.
主要方法:
- 基于9-iminoanthrone,9-imino-10-silaxanthone和9-imino-10-germaxanthone支架的新型光体的合成
- 用于选择性有机体/结构标记的光体对目标部分的结合.
- 在活细胞STED纳米镜中评估探针光物理性质,细胞吸收,毒性和性能.
主要成果:
- 成功合成了具有较大的斯托克斯移位 (> 140 nm) 的红色发射光染料.
- 开发了具有较低细胞毒性的选择性标记线粒体,溶酶体和F-actin的探针.
- 在神经元,人体纤维细胞,U2OS和HeLa细胞中使用775nmSTED激光对内源性点进行多色STED纳米扫描.
结论:
- 新型的大型斯托克斯转移染料是先进的活细胞成像的有效工具.
- 这些探测器促进了多色STED纳米镜,克服了传统的小斯托克斯转移染料的局限性.
- 开发的探测器为高分辨率的细胞动态可视化提供了多功能平台.
