克隆和cDNA的序列分析用于牛碳氧酶E

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 神经科学是一个神经科学.

背景情况:

• 碳氧胺酶E (CPE),也称为恩基法林转化酶,是一种碳氧胺酶B类酶.
• 它在分泌颗粒内对和其他神经的生物合成中发挥关键作用.
• CPE存在于可溶和膜结合的形式,分子质量略有差异.

研究的目的:

• 调查CPE的不同组织形式是否来自单个基因.
• 阐明CPE在神经处理中的遗传基础和潜在的广泛功能.

主要方法:

• 净化CPE的部分测序.
• 使用寡核酸探针从牛垂体cDNA库中分离了一个编码CPE的克隆.
• 分析牛体垂体多A) +RNA大小.
• 牛基因组DNA的限制分析.

主要成果:

• 隔离了编码CPE的cDNA克隆,确认了部分蛋白质序列,并揭示了对碳氧酶A和B的同质性.
• 该cDNA杂交到多种牛垂体RNA物种 (3.3,2.6和2.1kb),其中3.3kb的mRNA占主导地位.
• 基因组DNA分析表明,只有一个CPE基因.

结论:

• 单个CPE基因的存在表明CPE形式的变异可能是由于翻译后修改或替代拼接.
• 这种单基因假设支持CPE在各种组织中众多神经的生物合成中的广泛和基本作用.