牛乳头瘤病毒E2转激活基因产品与乳头瘤病毒DNA中的特定部位结合

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 病毒学 病毒学
• 遗传学 是一个遗传学.

背景情况:

• 增强剂是关键的cis作用的DNA元素,它们调节了真核生物中的基因转录.
• 增强剂激活转录的精确机制尚未完全理解.
• 牛乳头瘤病毒1型 (BPV) 的上游调控区域 (URR) 显示出增强剂活性.

研究的目的:

• 调查BPV URR的增强活性是否是BPV E2开放阅读框架 (ORF) 基因产品的直接或间接影响.
• 为了阐明BPV E2蛋白及其目标增强剂序列之间的分子相互作用.

主要方法:

• 利用一种细菌表达系统产生一种E2.
• 采用DNA-蛋白质复合体免疫沉试验来研究E2-URR相互作用.
• 在BPV和人类乳头瘤病毒 (HPV16) URR中确定了E2的特定DNA结合点.

主要成果:

• 证明E2直接结合到BPVURR中的四个特定部位.
• 在HPV16 URR中确定了一个单一的结合部位.
• 所有已识别的结合位都具有共同的核酸序列;含有该序列的23个基对片段抑制了E2与BPV URR的结合.

结论:

• 在BPV E2蛋白及其URR之间的相互作用代表转录增强的直接机制.
• 该系统为研究转录增强提供了有价值的模型,因为它能够净化和操纵效应蛋白 (E2) 和增强剂 (URR).