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编码维生素D的鸟类受体的互补DNA的分子克隆
Science (New York, N.Y.)
|March 6, 1987
概括
研究人员克隆了维生素D3受体的补充DNA (cDNA),这是维生素D作用中的关键蛋白质. 这一发现为真正的维生素提供了第一个受体序列,并为研究基因调节开辟了新的途径.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 内分泌学 在内分泌学.
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 维生素D3受体是细胞内蛋白质,对于调解1,25-二氧维生素D3 [1,25(OH) 2D3]的作用至关重要.
- 了解维生素D受体功能的分子基础对于理解其在各种生理过程中的作用至关重要.
研究的目的:
- 隔离和描述编码维生素D3受体的互补DNA (cDNA).
- 识别维生素D3受体序列中的保存域,并将其与其他核受体进行比较.
主要方法:
- 利用受体特异性单克隆抗体选一只的肠道lambda gt11cDNA表达库.
- 从克隆的cDNA中推断出氨基酸序列,并进行北方斑分析来检查信使RNA (mRNA) 表达模式.
- 与cDNA序列的杂交被用于指导维生素D3受体的细胞自由合成.
主要成果:
- 成功克隆了维生素D3受体的cDNA,揭示了与其他类固醇受体和gag-erbA瘤基因同类的保存的氨酸丰富区域.
- 在组织中鉴定了两个维生素D受体mRNA (2.6和3.2千基) 和小鼠纤维细胞中的4.2千基mRNA.
- 证明,在暴露于小鼠细胞的1,25(OH) 2D3.3.时,4.2基基基RNA物种显著增加.
结论:
- 克隆的cDNA代表了真正维生素的第一个受体序列,为进一步的研究提供了关键的工具.
- 这些发现突显了类固醇受体域的进化保护,并提供了对维生素D受体基因表达的调节的见解.