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人类胰岛素降解酶与大肠杆菌蛋白酶III具有结构和功能上的相同性
J A Affholter1, V A Fried, R A Roth
1Department of Pharmacology, Stanford University School of Medicine, CA 94305.
概括
研究人员分离并对胰岛素处理蛋白酶的补充DNA (cDNA) 进行了测序. 这种酶缺乏已知的蛋白酶共识序列,但与大肠杆菌蛋白酶III具有同质性,表明一种新的蛋白酶家族参与细胞间信号传递.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 酶学 是一种酶学.
背景情况:
- 一种对胰岛素有很高亲和力的蛋白酶与细胞胰岛素处理有关.
- 了解这种酶的分子基础对于破译胰岛素代谢至关重要.
研究的目的:
- 隔离和描述编码胰岛素结合蛋白酶的互补DNA (cDNA).
- 为了确定蛋白质的序列及其与已知的蛋白酶的关系.
主要方法:
- 补充DNA (cDNA) 的隔离和测序.
- 在体外转录和无细胞翻译.
- 通过联合电泳和免疫沉进行蛋白质分析.
- 序列同质分析. 序列同质分析.
主要成果:
- 获得了cDNA序列,推断出的氨基酸序列包含了13个已知的序列.
- 在体外转录和翻译过程中产生了与原生酶相同的蛋白质.
- 蛋白酶序列缺乏已知的蛋白酶类的共识序列,但显示与大肠杆菌蛋白酶III的同质性.
- 这两种酶都分裂胰岛素,位于周等离子体空间.
结论:
- 鉴定出来的蛋白酶代表了一种新型的蛋白酶类.
- 这种酶和大肠杆菌蛋白酶III可能属于参与细胞间信号传递的家族.
- 对这种蛋白酶家族的进一步研究可能会揭示对激素处理和信号通路的新见解.