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截然不同的克隆II类MHCDNA结合蛋白识别X盒转录元素
H C Liou1, M R Boothby, L H Glimcher
1Department of Cancer Biology, Harvard School of Public Health, Boston, Massachusetts 02115.
Science (New York, N.Y.)
|October 7, 1988
概括
研究人员确定了两种DNA结合蛋白,即小鼠X盒结合蛋白 (mXBP和mXBP-2),对于调节主要基因相容性复合体 (MHC) 类II基因表达至关重要. 这些蛋白质与X盒结合,突出了复杂的转录控制机制.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 免疫遗传学 免疫遗传学
- 转录条例 转录条例 转录条例
背景情况:
- 主体自身相容性复合体 (MHC) II类抗原是具有受限细胞类型表达的不可分割的膜蛋白.
- 在II类基因上游的共识序列 (X和Y框) 对它们的表达至关重要.
- 缺少X盒结合蛋白与严重的综合免疫缺陷疾病有关,这表明它们的调节作用.
研究的目的:
- 克隆和表征参与MHCII类基因转录调节的DNA结合蛋白.
- 研究这些蛋白质对II类基因内的调控元素的特异性.
主要方法:
- 使用lambda gt11表达系统对编码DNA结合蛋白的互补DNA (cDNA) 进行克隆.
- 使用X盒序列的电泳移动转移试验 (EMSAs) 进行DNA结合特异性的表征.
- RNA杂交分析以确定克隆cDNA的表达模式.
- 用DNA斑点分析来评估已识别的结合蛋白的基因家族大小.
主要成果:
- 两种不同的cDNA,lambda mXBP和lambda mXBP-2,编码小鼠X盒结合蛋白被分离出来.
- 这两种蛋白质都特别结合了Aα类II基因的X盒,但不是Eα或Eβ基因.
- 兰巴达mXBPcDNA杂交到6.2和3.0基基RNA物种,表达在Ia阳性和阴性细胞中.
- DNA斑点分析表明,lambda mXBP起源于一个多基因家族.
结论:
- 鼠X盒结合蛋白 (mXBP和mXBP-2) 被确定为MHCII类基因转录的关键调节者.
- 这些蛋白质对X盒具有特定的结合,有助于精确控制II类基因表达.
- 对MHCII类基因家族的转录控制的复杂性进一步体现了这些结合蛋白的多基因性质.