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突变的Trp抑制剂具有新的DNA结合特异性.

S Bass1, V Sorrells, P Youderian

  • 1Department of Biological Sciences, University of Southern California, Los Angeles 90089-1481.

Science (New York, N.Y.)
|October 14, 1988
PubMed
概括

在大肠杆菌酸盐抑制剂 (Trp抑制剂) 中的突变揭示了Thr81.

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科学领域:

  • 分子生物学分子生物学
  • 遗传学 是一个遗传学.
  • 生物化学 生物化学

背景情况:

  • 大肠杆菌的trpR基因编码了酸盐抑制剂 (Trp抑制剂).
  • Trp抑制剂通过与特定的DNA操作序列结合来调节托生物合成.
  • 对于基因调节研究来说,了解抑制剂-运行者相互作用至关重要.

研究的目的:

  • 调查特定氨基酸残留在Trp抑制剂的DNA结合特异性中的作用.
  • 为了阐明底层的分子机制Trp抑制剂-操作者相互作用.
  • 将Trp抑制剂的DNA结合策略与其他相关的DNA结合蛋白进行比较.

主要方法:

  • 用寡核酸导向的突变发生被用来产生36个突变的Trp抑制剂.
  • 突变抑制剂被测试了与28个不同的操作者序列的结合亲和力.
  • 野生类型和突变抑制剂之间的结合特异性的比较分析.

主要成果:

  • 在36种突变抑制剂中,11种突变抑制剂表现出改变的结合配置.
  • 五种突变体表现出新的结合特异性,表明特定残留物的关键作用.
  • Threonine-81 (Thr81) 的基和甲基被确定为操作者识别的关键.

结论:

  • 氨酸-81 (Thr81) 在Trp抑制剂-运行器结合特异性中起着双重作用.
  • 绝缘素-79 (Ile79) 和氨酸-80 (Ala80) 似乎没有介导特定序列的DNA接触.
  • Trp抑制剂的体内DNA相互作用机制与菌体兰巴和434抑制剂的相互作用机制显著不同.