可调节的异芳硫增强细胞内氨酸的分析
Hashim F Motiwala, Yu-Hsuan Kuo, Brittany L Stinger
1Department of Biological Chemistry , University of Michigan Medical School , 5220E MSRB III 1150 W. Medical Center Drive , Ann Arbor , Michigan 48109 , United States.
Journal of the American Chemical Society
|December 28, 2019
概括
新的异味硫探针提供快速和选择性的囊对细胞内蛋白质组分析. 这些试剂显著加快反应速率并提高稳定性,使得能够有效地发现3000多种反应性硫醇.
科学领域:
- 化学生物学
- 蛋白质组学
- 有机化学
背景情况:
- 半氨酸的结合对于化学生物学和蛋白质学至关重要.
- 现有的囊化试剂在反应速度和稳定性方面存在局限性.
研究的目的:
- 评估异味硫作为新型囊结合试剂的库.
- 评估结构修改对反应性和稳定性的影响.
- 在培养细胞中对这些探针进行全蛋白质分析.
主要方法:
- 综合和评估各种异芳库.
- 半氨酸结合反应的动态分析.
- 使用destiobiotin功能化的探针进行基于细胞的分析.
- 基于质谱的醇鉴定和量化.
主要成果:
- 选择异味硫替代剂增加了超过3个数量级的反应速率.
- 在培养细胞中,探针在毫米度下实现了快速和.
- 在本地细胞环境中,质谱检测确定了3000多种反应性/可访问性硫醇.
- 不同的探针类型之间观察到补充的囊蛋白检测.
结论:
- 异芳醇硫提供可调节,稳定和高度反应的软氨酸结合基架.
- 这些探针比传统的试剂在细胞内蛋白质组中具有显著的优势.
- 开发的方法使得有效的共价配体发现和深入的蛋白质组分析成为可能.


