具有大型疏水性2'-替代物的阿普塔默的选择
Qian Shao1, Tingjian Chen1, Kai Sheng1
1Department of Chemistry , The Scripps Research Institute , 10550 North Torrey Pines Road , La Jolla , California 92037 , United States.
Journal of the American Chemical Society
|January 22, 2020
概括
研究人员设计了一个DNA聚合酶,SFM4-3,以创建修改后的DNA. 这使得能够选择具有独特结合性质的新型体来治疗体.
科学领域:
- 生物化学
- 分子生物学
- 合成生物学
背景情况:
- DNA聚合酶通常识别天然的DNA基质.
- 修改DNA基可以改变它们的识别和功能.
- 工程酶为核酸操纵提供了新的可能性.
研究的目的:
- 开发一种能够识别和合成2'-改性DNA模板的DNA聚合酶.
- 用这种聚合酶来选择具有新功能的体.
- 探索体结构和活性中疏水性修饰的潜力.
主要方法:
- 用于识别2'-修饰基质的DNA聚合酶 (SFM4-3) 的定向演化.
- 使用SFM4 - 3合成2'-亚基改性DNA.
- 点击化学将疏水组连接到2'-亚部分.
- 对人类中性粒细胞弹性酶和因子IXa进行aptamer选择.
主要成果:
- 在标准条件下,SFM4-3成功地识别和放大2'-改性DNA模板.
- 使用SFM4 - 3选择了具有较大的疏水性2'替代剂的aptamers.
- 选择的阿普坦酶被证明与目标蛋白结合:人类中性粒细胞弹性酶和因子IXa.
- 这种工程聚合酶有助于制造具有类似蛋白质的疏水核的DNA体.
结论:
- SFM4-3 能够合成和放大具有多种2'疏水性修饰的DNA.
- 这种工程聚合酶是发现具有新折叠和新活动的体的强大工具.
- 这种方法为开发针对复杂蛋白质的基于aptamer的疗法开辟了新的途径.
