Jove
Visualize
联系我们
JoVE
x logofacebook logolinkedin logoyoutube logo
关于 JoVE
概览领导团队博客JoVE 帮助中心
作者
出版流程编辑委员会范围与政策同行评审常见问题投稿
图书馆员
用户评价订阅访问资源图书馆顾问委员会常见问题
研究
JoVE JournalMethods CollectionsJoVE Encyclopedia of Experiments存档
教育
JoVE CoreJoVE BusinessJoVE Science EducationJoVE Lab Manual教师资源中心教师网站
使用条款与条件
隐私政策
政策

相关实验视频

工程酶特异性通过"基质辅助催化"

P Carter, J A Wells

    Science (New York, N.Y.)
    |July 24, 1987
    PubMed
    概括
    此摘要是机器生成的。

    研究人员通过去除催化组并使用修改后的基质恢复活性来设计酶特异性. 这种"基质辅助催化"提供了一种创建高度特异性酶的新方法.

    相关实验视频

    相关概念视频

    您也可能阅读

    相关文章

    通过共同作者、期刊和引用图与本文相关的文章。

    排序
    Same author

    Best-Practice Biomarker Testing of Oesophago-Gastric Cancer in the UK: Expert Consensus Recommendations Developed Using a Modified Delphi.

    Clinical oncology (Royal College of Radiologists (Great Britain))·2024
    Same author

    Peri-operative management and analgesic strategy for a patient undergoing quadruple limb amputation.

    Anaesthesia reports·2024
    Same author

    An assessment of introducers used for airway management.

    Anaesthesia·2021
    Same author

    A demonstration of using formal consensus methods within guideline development; a case study.

    BMC medical research methodology·2021
    Same author

    Non-Invasive MRI of Blood-Cerebrospinal Fluid Barrier Function.

    Nature communications·2020
    Same author

    Management of mesh complications following surgery for stress urinary incontinence or pelvic organ prolapse: a systematic review.

    BJOG : an international journal of obstetrics and gynaecology·2019
    Same journal

    A native sulfur deposit in Gale crater, Mars.

    Science (New York, N.Y.)·2026
    Same journal

    Coordinated demise of harmful algal blooms.

    Science (New York, N.Y.)·2026
    Same journal

    Genetic effects put into context.

    Science (New York, N.Y.)·2026
    Same journal

    Bacteria share proteins to survive antibiotics.

    Science (New York, N.Y.)·2026
    Same journal

    Impacts shaped Earth's first continents.

    Science (New York, N.Y.)·2026
    Same journal

    Lariat RNA debranching prevents harmful siRNA burst in plants.

    Science (New York, N.Y.)·2026
    查看所有相关文章

    科学领域:

    • 生物化学 生物化学
    • 酵素工程是什么意思 酵素工程
    • 分子生物学分子生物学

    背景情况:

    • 酶的特异性对于生物功能至关重要.
    • 工程酶特异性是生物技术中的一个重大挑战.
    • 位点定向突变发生是一种常见的酶修饰工具.

    研究的目的:

    • 开发一种用于工程酶特异性的新方法.
    • 研究"基质辅助催化剂"的概念.

    主要方法:

    • 用于取代催化性histidine (His) 以alanine (Ala) 在Bacillus amyloliquefaciens subtilisin (His64Ala突变) 中的部位导向突变发生.
    • 使用各种基质进行了酶活性测定,包括N-succinyl-L-Phe-L-Ala-L-Ala-L-Phe-p-nitroanilide (sFAAF-pNA),N-succinyl-L-Phe-L-His-L-Ala-L-Phe-p-nitroanilide (sFAHF-pNA) 和N-succinyl-L-Phe-L-Gln-L-Ala-L-Phe-p-nitroanilide (sFAQF-pNA) 在内.
    • 分析了基质依赖的pH档案和大型多的水解.

    主要成果:

    • 在His64Ala突变中,sFAAF-pNA的催化效率与野生类型的潜相比降低了一百万倍.
    • 这种His64Ala突变物对His P2基质 (sFAHF-pNA) 的水解速度比Ala P2或Gln P2基质快400倍.
    • 野生类型的亚提利辛用类似的催化效率来化这三种基质.
    • 在His64Ala突变体中,通过利用基质的histidine侧链,证明了功能部分恢复.

    结论:

    • "基质辅助催化"是一种可行的策略,用于设计狭窄而有用的酶特异性.
    • 这种方法为酶设计和修改提供了新的基础.
    • 这些发现表明,胺蛋白酶的催化三元体具有潜在的进化中间体.