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在核酸折叠中插入可用序列的证据.

R M Starzyk, T A Webster, P Schimmel

    Science (New York, N.Y.)
    |September 25, 1987
    PubMed
    概括

    埃舍里希亚大肠杆菌异核糖转移RNA合成酶 (IleRS) 的内部删除表明,连接核酸折叠部分的主要部分可以在不影响核酸结合部位的情况下被删除,从而产生活性酶.

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    科学领域:

    • 生物化学 生物化学
    • 分子生物学分子生物学
    • 酶学 是一种酶学.

    背景情况:

    • 大肠杆菌的异核糖转移RNA合成酶 (IleRS) 对于蛋白质合成至关重要.
    • 结构建模表明,它的核酸折叠始于氨基末端区域.

    研究的目的:

    • 调查氨基终端核酸折叠在IleRS活动中的功能作用.
    • 为了确定内部删除对酶稳定性和核酸结合的影响.

    主要方法:

    • 局部定向突变发生,在IleRS.的核酸折叠区域内产生内部删除.
    • 酶活性测试用于评估突变酶的功能.
    • 对删除突变的蛋白质稳定性的分析.

    主要成果:

    • 核酸折叠区域内的最多145个连续氨基酸的删除导致了活跃的IleRS酶.
    • 这些删除的进一步扩展导致了不活跃或不稳定的蛋白质.
    • 与同类蛋白质的结构比较表明,活性删除删除了连接核酸折叠部分的细分.

    结论:

    • IleRS的核酸结合部位是坚固的,可以承受将核酸折叠的不同部分连接起来的显著多片段的去除.
    • 这些发现为合成酶的结构灵活性和功能适应性提供了洞察力.