通过将基因转移到3T3纤维细胞中,免疫球蛋白基因V(D) J重组酶活性的稳定表达

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 遗传学 是一个

背景情况:

• V(D) J重组对于适应性免疫是必不可少的,产生各种抗体和T细胞受体基因.
• 这一过程通常仅限于在特定发育阶段的淋巴细胞.
• 了解V(D) J复合酶的调节和激活是操纵免疫细胞发育和功能的关键.

研究的目的:

• 为了确定V(D) J重组酶活性表达的发育时间.
• 为了研究激活非淋巴细胞中V(D) J重组酶活性的潜力.
• 探索赋予V(D) J重组能力的最小遗传要求.

主要方法:

• 使用逆转录病毒重组基质来监测V(D) J重组酶活性.
• 采用DNA转移协议,包括转染,将遗传物质引入细胞.
• 在NIH 3T3纤维细胞和随后在稳定转染的纤维细胞中评估V(D) J重组.

主要成果:

• V(D) J复合酶活性仅在B前细胞中检测到.
• 一个DNA转移协议成功地激活了NIH 3T3纤维细胞中的V(D) J重组.
• 感染过的纤维细胞稳定表达V(D) J重组酶活性,其水平与活跃的B细胞前细胞相当.

结论:

• V(D) J重组酶活性在发育过程中受到调节,主要在淋巴细胞前体细胞中观察到.
• 非淋巴细胞可以通过基因操纵进行工程设计,以表现出V(D) J重组活性.
• 单个淋巴细胞特异性基因的表达可能足以在纤维细胞上赋予V(D) J重组酶活性.