相关实验视频
人类和老鼠互补DNA编码雄激素受体的分子克隆
C S Chang1, J Kokontis, S T Liao
1Ben May Institute, University of Chicago, IL 60637.
Science (New York, N.Y.)
|April 15, 1988
概括
研究人员从人类和老鼠组织中分离出用于雄激素受体的互补DNA (cDNA). 由此产生的蛋白质特异地结合了雄激素,证实了其作为受体的功能.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 内分泌学 在内分泌学.
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 雄激素受体 (ARs) 对于男性的性发育和功能至关重要.
- 了解AR结构和功能对于研究与雄激素相关疾病至关重要.
- 以前的研究表明ARs的存在,但缺乏详细的分子表征.
研究的目的:
- 隔离和描述编码雄激素受体的互补DNA (cDNA).
- 为了确认表达的雄激素受体蛋白的功能性质.
- 分析受体内保存的结构域.
主要方法:
- 构建和选人类丸和老鼠腹前列腺cDNA库.
- 孤立cDNA的核酸序列测序,以推断氨基酸序列.
- 人类ARcDNA的体外转录和无细胞翻译.
- 使用针对雄激素受体的自身免疫抗体进行免疫沉.
- 雄激素结合测试以评估特异性和亲和力.
主要成果:
- 从人类和老鼠组织中成功获得了编码雄激素受体的cDNA.
- 演的氨基酸序列揭示了保存的氨酸丰富的DNA结合域,这是类固醇受体的特征.
- 在体外翻译过程中产生了76千多的蛋白质,该蛋白质可被抗AR抗体免疫接收.
- 表达的蛋白质表现出与雄激素的特定和高亲和度结合.
结论:
- 这项研究成功地隔离和表征了来自人类和老鼠的雄激素受体cDNA.
- 表达的蛋白质具有特定的,高亲和度的雄激素受体的关键功能特征.
- 这些发现为了解雄激素受体功能及其在生物过程中的作用提供了分子基础.