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通过单个氨基酸突变,将PI定蛋白转化为不可分割的膜蛋白
G L Waneck1, M E Stein, R A Flavell
1Biogen Research Corporation, Cambridge, MA 02142.
Science (New York, N.Y.)
|August 5, 1988
概括
在Qa-2糖蛋白中发生的单个氨基酸变化将其从酸 (PI) 结合蛋白转化为一个完整的膜蛋白,改变其膜固特性.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- Qa-2 是一种细胞表面的糖蛋白,通过酸氨基醇 (PI) 与细胞膜结合.
- 它在结构上与I类移植抗原 (H-2K,D,L) 类似,这些抗原是不可分割的膜糖蛋白.
- Qa-2的跨膜段与H-2K,D,L的区别在于在位置295.5的阿斯巴达酸盐.
研究的目的:
- 调查改变Qa-2的跨膜段的功能后果.
- 为了确定特定的氨基酸替代是否可以改变Qa-2的膜 anchoring机制.
- 为了比较突变的Qa-2与H-2D等整体膜蛋白质的特性.
主要方法:
- 局部定向的突变发生引入Qa-2基因的单基变化,将阿斯巴酸替换为氨酸在位置295.
- 对细胞表面Qa-2表达和膜 anchoring的分析.
- 对PI特异性脂酶C和帕帕因裂变的敏感性进行测试.
- 评估PI附着在表达突变Qa-2的细胞中的其他内源蛋白质上的PI附着.
主要成果:
- 一个单一的氨基酸替代 (Asp295Val) 使细胞表面的Qa-2对PI特异性脂酶C水解不敏感.
- Asp295Val突变也增加了对帕帕因裂变的抵抗力,这是与H-2D共享的特性.
- 表达突变Qa-2的细胞保留了PI定其他蛋白质的能力,如Thy-1和J11D.
结论:
- 在位置295的单个氨基酸变化将Qa-2从PI-链接的糖蛋白转化为不可分割的膜蛋白.
- 这种突变模仿了H-2D移植抗原的膜固特征.
- 这些发现强调了特定氨基酸在确定蛋白质膜关联中的关键作用.