通过细胞融合识别与正反作用因子相互作用的基因序列

科学领域:

• * 分子生物学 * 分子生物学
• * 基因调控 * 基因调控
• * 细胞生物学 * 细胞生物学

背景情况:

• *细胞融合研究表明,调控因素控制细胞特异性基因表达.
• *与这些因素相互作用的cis作用DNA序列的特征是具有挑战性的.
• *以前的方法限制了新型调节性DNA序列的识别.

研究的目的:

• * 开发和应用一种转染-融合技术,用于研究细胞类型特定的基因调节.
• * 确定参与基因调节的cis作用DNA序列和DNA结合部位.
• * 描述细胞融合中介基因激活的机制.

主要方法:

• * 结合稳定基因转移与短暂的异质细胞形成 (转染-融合).
• * 使用静止的老鼠益生素促进区稳定地转移到小鼠纤维细胞中.
• *采用了核运行测定和5'-删除突变分析.

主要成果:

• *与大鼠垂体细胞的融合激活了被转移的大鼠益生素促进体的转录.
• * 一个30个基对的DNA序列被确定为这种激活必不可少.
• *该技术没有激活转移的老鼠生长激素促进物或内源基因.

结论:

• * 转染-融合技术成功识别了一种新的调节性DNA序列.
• *这种方法有效地发现了参与细胞类型特定基因表达的cis-acting元素.
• * pituitary 细胞具有特定的因素,可以激活前乳素基因促进体.