温度调节稳定性,联结 (Mg2+和ATP),以及GroEL-GroES复合物的固态度
Thomas E Walker1, Mehdi Shirzadeh1, He Mirabel Sun1
1Department of Chemistry, Texas A&M University, College Station, Texas 77843, United States.
像GroEL这样的Chaperonin对于细胞功能至关重要. 这项研究表明,温度显著地破坏了GroEL和GroEL-GroES复合体的稳定性,影响了它们的ATP结合和固态度,这对蛋白质折叠至关重要.
科学领域:
- 生物化学
- 分子生物学
- 结构生物学
背景情况:
- 沙佩罗宁是依赖ATP的分子机器,对于蛋白质折叠,重新折叠和组装至关重要,维护细胞功能.
- GroEL和GroEL-GroES是对其蛋白质折叠能力进行了广泛研究的模型护理系统.
研究的目的:
- 研究温度和不同的ATP度对GroEL和GroEL-GroES的稳定性和复合形成的影响.
- 在不同的温度条件下阐明Mg2+和ATP在调节沙佩罗宁复合体固体测量中的作用.
主要方法:
- 使用可变温度电喷射离子 (vT-ESI) 原生质谱分析GroEL和GroEL-GroES复合物.
- 这项研究研究了温度,ATP和Mg2+度对复合稳定性和静态度的影响.
主要成果:
- 在明显低于点 (50°C和45°C) 的温度下观察到GroEL和GroES复合物的不稳定.
- 鉴定出新的温度依赖反应产物 (GroEL14-GroESy-ATPn) 没有报告,受Mg2+和ATP水平的影响.
- 在24°C和40°C之间观察到GroEL- GroES复杂静脉测量 (GroEL14- GroES7与GroEL14- GroES8) 的变化.
结论:
- 可变温度原生质谱学提供了诸如 chaperonins 这样的分子机器的稳定性和动态的宝贵见解.
- 在GroEL-GroES中,温度在调节ATP结合和复杂固体测量中起着关键作用,影响蛋白质折叠周期.
- 2+度对GroEL-GroES复合体的固体测量有比ATP度更明显的影响.
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