通过神奇角度旋转的动态核极化NMR对细胞内的药物进行量化
Andrea Bertarello1, Pierrick Berruyer1, Markus Artelsmair2
1Institut des Sciences et Ingénierie Chimiques, École Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL), CH-1015 Lausanne, Switzerland.
魔法角度旋转动态核极化 (MAS DNP) 现在可以进行细胞内药物度的非破坏性量化. 这种技术可以准确地测量皮科莫尔范围内的药物含量,从而推进药物疗效研究.
科学领域:
- 生物物理
- 药理学
- 生物化学
背景情况:
- 精确的细胞内药物度测量对于了解药物的功能和疗效至关重要.
- 目前的实验技术难以满足非破坏性,敏感和定量细胞内药物分析的要求.
- 检测低微分子到纳米分子度的药物 (每百万细胞中的picomoles到femtomoles) 仍然是一个重大挑战.
研究的目的:
- 证明神奇角度旋转动态核极化 (MAS DNP) 对于量化细胞内药物度的有用性.
- 建立一种非破坏性的方法来测量细胞内的药物量,而不会改变药物或标.
- 在皮克摩尔到女性摩尔范围内实现细胞内药物分子的敏感检测.
主要方法:
- 使用定量15N MAS DNP方法.
- 使用药物分子的15N标签进行增强检测.
- 测量 [15N]CHIR-98014,一个Wnt信号通路激活剂的细胞内药物含量.
主要成果:
- 使用MAS DNP成功量化细胞内药物量.
- 确定每百万细胞中几十到几百个皮科摩尔的 [15N]CHIR-98014 的细胞内药物水平.
- 证明MAS DNP能够满足敏感,定量和非破坏性药物度测量的要求.
结论:
- 魔角旋转动态核偏振 (MAS DNP) 是量化细胞内药物度的可行技术.
- 这项研究是MAS DNP用于估计细胞内药物量的首次成功应用.
- 开发的方法为药物度分析提供了非破坏性和敏感的方法,有助于药物发现和开发.
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