在大肠杆菌中表现出一种DNA序列的表现形式,该序列编码的是小鼠二水酸减少酶

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 是一个遗传学.
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 细菌等离子体是基因操纵的关键工具.
• 在 prokaryotic 系统中表达哺乳动物基因具有独特的挑战.
• 叶酸二酸减少酶是叶酸代谢中的一个关键酶.

研究的目的:

• 构建和分析能够表达哺乳动物遗传序列的细菌质粒.
• 为了研究表现小鼠二叶酸还原酶在细菌中的表现的表型后果.
• 评估这种工程塑在赋予耐药性的潜力.

主要方法:

• 构建含有小鼠二水酸减少酶基因的复合细菌等离子体.
• 细菌宿主细胞的转化与工程塑体.
• 转变细胞的表型分析,包括酶分析和耐药性测试.
• 对酶活性,免疫反应性和分子大小进行表达蛋白质的表征.

主要成果:

• 成功创建了表达哺乳动物遗传序列的细菌质粒.
• 表达的蛋白质表现出酶性质,免疫反应性和分子大小与小鼠二氧化酸盐减少酶一致.
• 含有等离子体的宿主细菌细胞对抗代谢药物trimethoprim表现出耐药性.

结论:

• 细菌等离子体可以被设计为包含和表达功能性哺乳动物基因.
• 在细菌中小鼠二叶酸减少酶的表达赋予了对trimethoprim的耐药性.
• 这表明了研究哺乳动物基因功能和开发新生物技术应用的可行系统.