一个新的T抗原阴性HEK293细胞系,提高了AAV生产力

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 细胞线发展发展 细胞线发展
• 基因治疗制造业 基因治疗制造业

背景情况:

• 人类胚胎 (HEK) 293细胞被广泛用于病毒载体的生产.
• 在HEK293T细胞中存在SV40 T抗原编码基因,这对临床制造提出了安全问题.
• 现有的电池线需要修改,以满足严格的监管要求.

研究的目的:

• 开发一种新的,T抗原阴性HEK 293细胞系,以提高基因疗法制造中的安全性.
• 确保新的细胞系保持高的病毒载体生产率和细胞完整性.
• 创建一个适合大规模生产腺相关病毒 (AAV) 的CMC合规细胞系.

主要方法:

• 使用CRISPR-Cas9基因编辑技术删除HEKExpress细胞中的T抗原编码位点.
• 产生并选多个克隆衍生细胞群体的T抗原消极性.
• 进行了稳定性研究,并评估了修改细胞系中的AAV生产效率.

主要成果:

• 成功生成了众多T抗原阴性克隆细胞群.
• 证实T抗原删除不会对细胞生长,活力或AAV生产力产生不利影响.
• 在各种尺度上,通过新的HEKzeroT细胞系可实现的高AAV标位.

结论:

• HEKzeroT细胞系是一种安全有效的替代品,用于无T抗原的病毒载体生产.
• 这一发展解决了与临床基因治疗制造中的HEK293T细胞相关的安全问题.
• HEKzeroT促进了强大的和可扩展的AAV生产,满足CMC合规标准.