建立一个CRISPR/Cas9介导的有效淘汰系统Trichoderma hamatum T21和颜料合成PKS基因淘汰
Ning Luo1,2, Zeyu Li2, Jian Ling2
1Biocontrol Engineering Laboratory of Crop Diseases and Pests of Gansu Province, College of Plant Protection, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China.
Journal of fungi (Basel, Switzerland)
|May 26, 2023
概括
研究人员开发了一种有效的CRISPR/Cas9基因编辑系统,用于生物控制的真菌Trichoderma hamatum. 这一突破使其基因和生物控制机制的详细研究成为可能.
科学领域:
- 农业科学 农业科学
- 分子生物学分子生物学
- 菌类学 菌类学是指菌类学.
背景情况:
- 特里科德尔马哈马图姆是一种有价值的细丝状真菌,用于生物控制植物疾病和杀真菌剂的开发.
- 有限的基因淘汰技术阻碍了对T. hamatum的基因功能和生物控制机制的研究.
研究的目的:
- 建立一个高效的CRISPR/Cas9基因编辑系统,用于Trichoderma hamatum.
- 为了使功能基因组学研究和T. hamatum. 的生物控制机制研究.
主要方法:
- 的基因组组装 T. hamatum T21 (41.4 Mb, 8170 个基因).
- 开发一种具有双 sgRNA 标和选标记的 CRISPR/Cas9 系统.
- 构建CRISPR/Cas9和供体DNA等离子体来破坏Thpyr4和Thpks1基因.
主要成果:
- 成功破坏了Thpyr4 (100%的效率) 和Thpks1 (89.1%的效率) 基因.
- 现型和分子鉴定证实了淘汰菌株.
- 测序揭示了目标部位的删除 (NHEJ) 或GFP插入 (HR),表明了不同的DNA修复途径.
结论:
- 在T. hamatum中首次成功建立了一个高效且方便的CRISPR/Cas9系统.
- 这个系统对于功能基因组学和Trichoderma和其他丝状真菌的生物控制研究至关重要.


