如果qPCR检测SARS-CoV-2或其他病原体缺乏内源内部控制,该怎么办? 一个简单的测试在家政基因
Aleksandra Kuzan1,2, Ivo Tabakov1,3, Lukasz Madej1,4
1Molecular Pathology Centre Cellgen, 50-353 Wroclaw, Poland.
Biomedicines
|May 27, 2023
概括
这项研究开发了一种低成本的RT-qPCR测试,以确认分子诊断中的遗传物质质量. 该试验验证了基本代谢基因表达,防止感染和癌症检测中的假阴性.
科学领域:
- 分子诊断学 分子诊断学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 许多分子诊断测试缺乏内部控制,风险是错误的负结果.
- 确保遗传物质质量对于准确的分子诊断测试至关重要.
研究的目的:
- 设计一个简单的,低成本的RT-qPCR试验.
- 确认基本代谢蛋白的表达作为遗传物质质量的指标.
- 为了验证测试用于分子诊断.
主要方法:
- 开发了针对GADPH和ACTB基因的定量PCR (qPCR) 试验.
- 生成标准曲线来评估测试性能.
- 确定反应效率和检测极限 (LOD).
主要成果:
- 获得了高度相关的标准曲线 (R2:0.9955-0.9956).
- 证明了较高的反应产量 (85.5-109.7%).
- 已建立的低LODs (GAPDH的0.0057 ng/μL,ACTB的0.0036 ng/μL).
结论:
- 开发的RT-qPCR测定是分子诊断的有效内部控制.
- 这些通用测试适用于各种样本类型.
- 该测试可以提高诊断感染 (例如,SARS-CoV-2) 和癌症的可靠性.


