优化gp145的生产,一个HIV-1信封糖蛋白疫苗候选物,并将其封装在关素微粒中

科学领域:

• 生物制药生产 生物制药生产
• 疫苗的研发工作正在进行中.
• 蛋白质工程是一种蛋白质工程.

背景情况:

• 艾滋病毒包膜蛋白 (Env) gp145是疫苗开发的关键目标.
• 有效表达和净化gp145对于生产可行的疫苗候选人至关重要.
• 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞是生产复杂糖蛋白质的常见宿主.

研究的目的:

• 开发和优化一个可扩展的管道来表达,净化和表征HIV Env gp145.5.
• 为了确保gp145生物制药的质量和本土性质.
• 为潜在的临床前和临床应用提出一种新的gp145显示微粒.

主要方法:

• 优化摇瓶和生物反应器中的细胞培养条件,包括pH值调整.
• 开发符合当前良好制造实践 (cGMP) 的分析方法.
• 描述技术:成像的毛细管异电聚焦,动态光散射,生物层干扰测量,圆形二极化和MALDI-TOF质谱.

主要成果:

• 在pH 6.8的50L生物反应器中达到101mg/L的表达水平,几乎是以前标位的两倍.
• 验证了gp145.5的适当的糖化,三元结构和与原生相似的特性 (抗体结合,二次结构).
• 使用多属性质谱分析证明与参考标准的相似性.

结论:

• 开发的管道使高质量的HIV Env gp145.145的稳健和可扩展的生产成为可能.
• 综合性表征证实了gp145对于疫苗开发的适用性.
• 一个新的gp145封装的瓜诺辛微粒为未来的试验提供了一个有希望的平台.