一个基于重组化学雪松病毒的替代者中和测试平台,用于致病性海尼帕病毒

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 尼帕病毒 (NiV) 和亨德拉病毒 (HeV) 是高度致病的亨尼帕病毒,在人类和动物中引起严重疾病.
• 雪松病毒 (CedV) 是一种非致病性病毒,为开发更安全的研究工具提供了潜在的平台.
• 现有的海尼帕病毒中和测定常常需要高制设施,限制可访问性和吞吐量.

研究的目的:

• 使用重组雪松病毒 (rCedV) 逆转基因系统创建具有复制能力的仿真河内病毒.
• 建立一个快速,高通量和定量替代物中和试验对NiV和HeV.
• 评估这些仿真病毒对测试单克隆抗体和血清中和的实用性.

主要方法:

• 取代了rCedV的融合 (F) 和附着 (G) 糖蛋白基因与来自NiV-孟加拉国 (NiV-B) 或HeV的基因.
• 生成的仿真病毒 (rCedV-NiV-B和rCedV-HeV) 有或没有记者基因 (GFP或光酶).
• 使用GFP编码的仿真体建立了光减少中和试验 (FRNT),并将结果与斑块减少中和试验 (PRNT) 进行了比较.

主要成果:

• rCedV仿真体诱导了I型干扰素反应,并使用以弗林-B2 / B3作为入口受体,类似于致病性海尼帕病毒.
• 对仿真病毒的单克隆抗体的中和功效与对抗真实NiV-B和HeV的抗体高度相关.
• 开发的FRNT试验证明了与PRNT的高相关性,并可以测量免疫动物的血清中和标位.

结论:

• 表达NiV-B或HeV糖蛋白的复合雪松病毒嵌合体提供了一个真实的基于henipavirus的替代者中和试验.
• 该FRNT测定是快速的,具有成本效益,适合在高封闭范围之外使用,促进更广泛的尼病毒研究.
• 这些工具可以帮助开发和评估治疗抗体和针对尼帕和亨德拉病毒的疫苗.