通过亲和力拉向MS识别潜在的HDAC11脱酶基质
Yandong Zhang1, Qian Zhao1, Hening Lin2
1Department of Chemistry and Chemical Biology, Cornell University, Ithaca, NY, United States.
Methods in enzymology
|May 28, 2023
概括
基斯脱乙酶11 (HDAC11) 从蛋白质中去除脂肪基. 我们使用稳定同位素标记与细胞培养中的氨基酸 (SILAC) 蛋白质组学来识别HDAC11.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 蛋白质组学是指蛋白质组学.
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 氨酸脂肪化是一种关键的蛋白质转化后修饰 (PTM),参与了许多生物过程.
- 基斯脱乙酶11 (HDAC11) 是基斯脱乙酶 (HDAC) 家族中唯一的IV类成员,具有显著的氨酸脱脂肪酶活性.
- 了解HDAC11的功能需要识别其生理基质和它相互作用的蛋白质.
研究的目的:
- 开发和详细介绍一种识别HDAC11.11互动组的方法.
- 通过互动原子分析,揭示由HDAC11调节的生理基质.
- 建立一种基于SILAC的多功能蛋白质组学策略,适用于其他PTM酶.
主要方法:
- 在细胞培养中使用稳定同位素标记用氨基酸 (SILAC) 进行定量蛋白质组学.
- 进行交互原子分析,以识别与HDAC11结合的蛋白质.
- 应用基于质谱的蛋白质组学来分析蛋白质相互作用.
主要成果:
- 通过使用所述的SILAC蛋白质组学策略,成功识别了HDAC11相互作用体.
- 该方法为发现HDAC11.11的新基质提供了基础.
- 这种方法适用于研究其他翻译后修饰酶的相互作用体.
结论:
- 开发的SILAC方法有效地识别了HDAC11的相互作用体及其潜在基质.
- 这项研究有助于更深入地了解氨酸脂肪化及其通过HDAC11.11的调节.
- 该方法可以广泛应用于研究其他PTM酶及其生物作用.
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