通过使用修改的三明治ELISA测试,从中性细胞外细胞陷中量化髓氧化酶-DNA和中性细胞弹性酶-DNA复合体

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 分子生物学分子生物学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 中性粒细胞外细胞陷 (NETs) 是由中性粒细胞释放的网状结构.
• 网络包括DNA,颗粒蛋白质 (髓氧化酶[MPO],中性粒细胞弹性酶[NE]) 和细胞质蛋白质.
• 在临床环境中测量NETs的现有方法缺乏灵敏度和可靠性.

研究的目的:

• 开发一种灵敏可靠的测试方法来量化流通的NET组件.
• 测量MPO-DNA和NE-DNA复合体作为NETs的特定生物标志物.
• 在临床样本中评估试验的性能,包括COVID-19患者.

主要方法:

• 开发了一种修改的三明治酶链接免疫吸收试验 (ELISA).
• 该试验使用针对MPO或NE的单克隆抗体作为捕获抗体.
• 一种特定于DNA的抗体作为检测抗体来定量MPO-DNA和NE-DNA复合体.

主要成果:

• 开发的试验表现出良好的线性和高精度 (试验间和试验内).
• 与健康对照组相比,COVID-19和急性呼吸困扰综合征患者的MPO-DNA和NE-DNA等离子体度显著升高.
• 该试验有效地检测到人体血和培养超水生物中的NET成分.

结论:

• 为量化MPO-DNA和NE-DNA复合体而建立了一种新,敏感和可靠的测定方法.
• 这种测试对于在各种生物样本中调查NET特征是有价值的.
• 这些发现突显了NET组件作为COVID-19等疾病中的生物标志物的潜力.