通过芳香氨基酸调节的细胞代谢的生物对等化学成像
Pegah Bagheri1, Khang Hoang1, Chan-Yu Kuo1
1Shu Chien-Gene Lay Department of Bioengineering, University of California San Diego.
Journal of visualized experiments : JoVE
|May 29, 2023
概括
这项研究引入了一种新的光学成像平台,可视化细胞如何使用必需芳香氨基酸 (AAA) 进行新陈代谢. 该方法为实时跟踪新合成的蛋白质和脂质提供了高特异性.
科学领域:
- 细胞代谢的细胞代谢.
- 生物医学成像学 生物医学成像学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 基本芳香氨基酸 (AAA) 对于细胞生长和生物质合成至关重要.
- 癌细胞对AAA的需求很高,以支持快速增殖.
- 目前的成像方法缺乏特异性,需要广泛的样本准备以进行现场代谢分析.
研究的目的:
- 开发一种非侵入性的光学成像平台,以在现场可视化AAA的细胞代谢.
- 为了能够直接可视化细胞如何利用AAA来合成新的生物质.
- 为研究细胞过程中的AAA调节提供一个工具.
主要方法:
- 开发一个结合二氧化 (D2O) 探测与刺激拉曼散射 (DO-SRS) 和两光子激发光 (2PEF) 的光学成像平台.
- 将DO-SRS和2PEF模式集成到一个单一的显微镜系统中.
- 应用平台可视化HeLa细胞中的代谢活动.
主要成果:
- 在单个HeLa细胞内可视化新合成的蛋白质和脂质方面,DO-SRS平台实现了高空间分辨率和特异性.
- 2PEF模式成功地检测到尼古丁胺氨酸二核酸 (NADH) 和Flavin的无标签自信号.
- 图像系统与体外和体外模型兼容.
结论:
- 开发的DO-SRS和2PEF集成成像系统为细胞AAA代谢的现场可视化提供了强大的工具.
- 这一平台可以无标签检测高特异性的代谢活动和生物质合成.
- 该系统在体外和体内应用的灵活性为代谢研究开辟了新的途径.


