从成年和发育中的小鼠试验中分离出未差异化的精子
Vera van Melis1, Lorena Roa-de la Cruz1, Brian P Hermann2
1Department of Neuroscience, Developmental and Regenerative Biology, The University of Texas at San Antonio, San Antonio, TX, USA.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|May 30, 2023
概括
这项研究详细介绍了一种隔离小鼠精子的方法,这对于了解男性生育能力和生殖线发育至关重要. 该协议产生了纯种群,用于进一步研究不孕症和精子生成.
科学领域:
- 生殖生物学 生殖生物学
- 发展生物学 发展生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 精子,包括精子干细胞 (SSC),对于持续的精子生成和男性生育能力至关重要.
- 了解精子是提高男性生殖线发育和不孕不育知识的关键.
研究的目的:
- 描述一项用于从成年和发育中的小鼠丸中分离精子.
- 为下游应用提供无差异化精子的纯种群.
主要方法:
- 从成年老鼠丸中分离精子,使用酶消化,Perkoll预富和FACS (CD9bright,ID4-EGFP+) 来分离精子.
- 从出生后第6天 (P6) 的小鼠丸中通过素-DNase消化和FACS (ID4-EGFP+) 来分离精子.
主要成果:
- 该协议成功地从成年和P6小鼠丸中分离出几乎纯净的未分化精子的种群.
- 孤立的精子可以进一步细分并用于各种分析,包括转录组学,表观组学和功能研究.
结论:
- 该协议提供了一种可靠的方法来获得高纯度的精子.
- 隔离的细胞适用于各种下游应用,促进男性生殖生物学和不孕症的研究.
