在人类细胞中对S-基甲基,GSH和GSSG的基于UHPLC-HRMS的分析
María Eugenia Monge1, Manuela R Martinefski2,3, Mariela Bollini2
1Centro de Investigaciones en Bionanociencias (CIBION), Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Ciudad de Buenos Aires, Argentina. maria.monge@cibion.conicet.gov.ar.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|May 31, 2023
概括
研究人员开发了一种新方法来合成和检测S-hydroxymethyl-GSH (HSMGSH),这是一个关键的甲甲代谢物. 这项技术有助于通过测量GSH,GSSG和HSMGSH来了解细胞氧化还原平衡和甲排毒途径.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 细胞的新陈代谢
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 谷氨 (GSH) 是一种至关重要的内源性抗氧化剂,维持细胞氧化还原平衡.
- GSH与甲之类的电友反应,形成S-基甲基-GSH (HSMGSH).
- HSMGSH是甲代谢中的重要中间体,由酒精脱酶5 (ADH5) 作用.
研究的目的:
- 用于化学合成S-基甲基-GSH (HSMGSH).
- 建立一个分析管道,用于在复杂的生物样本中识别HSMGSH.
- 为了同时量化GSH,GSSG和HSMGSH,进行全面的甲-GSH代谢分析.
主要方法:
- HSMGSH的化学合成.
- 超高性能液体色谱与高分辨率质谱学 (UHPLC-HRMS) 结合,用于化合物识别.
- 在细胞提取物中同时确定GSH,GSSG和HSMGSH.
主要成果:
- 成功合成了HSMGSH的化学合成.
- 开发一个强大的UHPLC-HRMS管道,用于复杂矩阵中的HSMGSH检测.
- 该方法可以同时测量参与甲脱毒的关键代谢物.
结论:
- 描述的方法为研究甲-GSH相互作用提供了有价值的工具.
- 这种方法增强了对细胞氧化还原稳定和排毒机制的理解.
- 该管道提供了关于细胞水平上甲甲代谢的广泛见解.
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