间接的CRISPR查与光转换揭示了药物耐药性的关键因素与细胞-细胞相互作用
Keisuke Sugita1, Iichiroh Onishi1, Ran Nakayama1
1Department of Comprehensive Pathology, Graduate School of Medical and Dental Sciences, Tokyo Medical and Dental University (TMDU), Tokyo, Japan.
Communications biology
|June 1, 2023
概括
研究人员开发了间接的CRISPR查,以确定影响癌症药物耐药性的支持细胞. 这种方法揭示了关键基因,为改善癌症治疗结果提供了新的治疗点.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 基因组学就是基因组学.
- 癌症研究 癌症研究
背景情况:
- 评估瘤微环境中的间接细胞-细胞相互作用是复杂的.
- 了解支持细胞在耐药性中的作用,需要先进的查方法.
研究的目的:
- 发明和验证一种间接的CRISPR查方法,用于识别通过细胞与细胞相互作用调解药物耐药性的支持细胞中的基因.
- 发现药物耐药性的新机制和潜在的治疗点.
主要方法:
- 在支持细胞中使用可光转换光蛋白 (Dendra2) 的间接CRISPR查.
- 与白血病细胞共同培养随机突变的支持细胞以诱导药物耐药性.
- 通过绿色到红色的光转换和确定了候选基因,通过绿色到红色的光转换分离了耐药性介导的支持细胞.
主要成果:
- 确定了39个候选基因,这些基因参与支持细胞介导的耐药性.
- 在支持细胞中C9orf89,MAGI2,MLPH或RHBDD2的淘汰会降低癌细胞亡.
- 临床胰腺癌纤维细胞中的低RHBDD2表达与预后不佳相关,并且与CXCL12负相关.
结论:
- 建立了一个间接的CRISPR选平台,用于剖析细胞相互作用机制.
- 这种方法可以揭示未知的生物过程,并确定常规化疗的新药标.


