使用冠军pET SUMO系统增强活性复合人间白内素-29的可溶性表达
Ayesha Munir1, Nadeem Ahmed2, Muhammad Akram1
1Centre of Excellence in Molecular Biology, University of the Punjab, Lahore, Pakistan.
Biotechnology letters
|June 2, 2023
概括
这项研究使用ChampionTM pET SUMO系统在大肠杆菌中实现了生物活性复合人间白素-29 (rhIL-29) 蛋白的高产,可溶性表达. 该方法产生了99%的纯净活性蛋白,证明了其在重组蛋白质生产中的有效性.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 蛋白质表达方式
背景情况:
- 在大肠杆菌中的重组蛋白表达对于治疗性蛋白质生产至关重要.
- 获得可溶性和生物活性蛋白质仍然是一个挑战.
研究的目的:
- 为了优化可溶和生物活性复合人体介质素-29 (rhIL-29) 在大肠杆菌中的表达.
- 评估ChampionTM pET SUMO表达系统在高产蛋白生产中的有效性.
主要方法:
- 在ChampionTM pET SUMO载体中克隆了对Codon优化的IL-29基因.
- 在各种大肠杆菌菌株 (Rosetta 2(DE3),Rosetta 2(DE3) pLysS,Rosetta-gami 2(DE3) 中测试了表达.
- 通过SUMO融合合作伙伴的裂变,获得原生rhIL-29.
主要成果:
- 实现了rhIL-29的高水平可溶性表达.
- 大约98毫克的纯 (99%) 原生rhIL-29,每升培养得到.
- 纯化rhIL-29在反扩散试验中表现出生物活性.
结论:
- 冠军TM pET SUMO表达系统促进可溶性,生物活性重组人体蛋白的高产量.
- 这种系统在生产活性rhIL-29.9时比其他表达载体具有优势.
- 该方法适用于大规模生产治疗性蛋白质.
