选一种有效的双腺关联病毒分裂细胞因子基编辑系统,用于C-to-T转换
Qianyi Liu1,2, Yuxi Chen1,2, Sihui Hu1,2
1MOE Key Laboratory of Gene Function and Regulation, State Key Laboratory of Biocontrol, School of Life Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou, China.
Human gene therapy
|June 6, 2023
概括
通过双腺相关病毒 (AAV) 传递的新分裂细胞因子基编辑器 (CBE) 系统可以实现高效的基因编辑. 这种双AAV方法克服了在体内基因治疗应用中的AAV大小限制.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 基因治疗 基因治疗
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 基基编辑的cytidine到thymidine提供了治疗潜力.
- 基因相关病毒 (AAV) 是一种常见的基因疗法载体.
- 由于AAV的包装能力有限,因此阻碍了大型基因编辑工具的交付,例如细胞基编辑器 (CBE).
研究的目的:
- 开发一个分裂的细胞酶基编辑器 (CBE) 系统,用于双重腺相关病毒 (AAV) 传递.
- 为了克服AAV在体内基因编辑应用中的包装限制.
主要方法:
- 使用11个分裂站点和2个分裂内部 (Npu,Rma) 构建了22个分裂-BE3对.
- 使用GFP记者系统和293T和HeLa细胞内源性部位选的分裂-BE3对.
- 在细胞培养和成年老鼠眼中验证的双AAV分裂-BE3疗效.
主要成果:
- 从初始查中确定了6个有前途的分裂-BE3对.
- 分解-BE3-Rma674,分解-BE3-Rma713和分解-BE3-Rma1005显示了有效的C到T转换.
- 在小鼠视网膜色素上皮细胞中,Split-BE3-Rma674在体内实现了最大的C-to-T编辑效率23.29%.
结论:
- 开发了一种新且有效的分裂-BE3系统,用于双AAV交付.
- 该系统可方便在体内使用需要CBE的基因疗法应用.
- 分裂-BE3系统克服了基因编辑的AAV包装约束.


